DNA主要分布于细胞核中,RNA主要分布于细胞质中。 本文来自文库分享网www.wkfxw.com
一般用吡罗红甲基绿混合染色剂将细胞染色以显示DNA和RNA在细胞中的分布。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色,以此达到区分的目的。
盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、吸水纸、显微镜。
人的口腔上皮细胞、蒸馏水、质量分数为0.9%的NaCl溶液、质量分数为8%的盐酸。
吡罗红甲基绿混合染色剂( 取A液20mL、B液80mL配成染色剂,使用时现配。A液:取吡罗红甲基绿粉1g,加入100mL蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用。B液:取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL。取稀释的乙酸钠溶液30mL和乙酸20mL,加蒸馏水50mL,pH为4.8的溶液)。
一、制片:制作人口腔上皮细胞临时装片
1.在洁净的载玻片上用滴管滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。
2.用消毒牙签在自己的口腔内侧壁上轻刮几下,再把牙签上附有碎屑的一端放在液滴中涂抹几下。
3.用火柴点燃酒精灯,将涂有口轻上皮细胞的载玻片烘干。
如图:
二、水解
1 .在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。
2.在大烧杯中加入30℃温水。
3.将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
如图:
三、冲洗
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
如图:
四、染色
1.用吸水纸吸去载玻片上的水分。
2.将吡罗红甲基绿混合染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min。
3.吸去多余染色剂,盖上盖玻片。
如图:
五、观察
1.低倍镜观察:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰。
2.高倍镜观察:调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。可以清楚地看到被染成绿色的DNA主要集中于细胞核中,而被染成红色的RNA主要集中于细胞质中。如图所示:
DNA主要分布于细胞核中,但细胞质中线粒体与叶绿体内也有少量分布。
RNA主要分布于细胞质中,但大部分RNA是在细胞核中合成后被运往细胞质的。