可以根据相似相溶原理进行色素的提取,再通过薄层色谱法对提取出来的色素进行分离。
绿叶,研钵,层析缸,薄层板,展开剂,毛细管
旋转蒸发仪
制备粗样品:称取a g洗干净的绿叶,用剪刀剪碎并加入a ml甲醇搅拌均匀,并在研钵中研磨约5mim,然后用布氏漏斗抽滤,弃去滤液。将绿叶汁放回研钵,每次用20ml为3:2(以下都为体积比)的石油醚-甲醇萃取两次。
除甲醇:合并萃取液,并用分液漏斗加水萃取其中的甲醇。萃取时如果发生乳化现象,可以再向其中加入一些水。收集石油醚层液体并用无水硫酸钠干燥。
浓缩:把上述萃取液体通过旋转蒸发仪浓缩,至体积为1ml为止。用青霉素小瓶收集。
点样:用笔尖较钝的铅笔在薄层板一端画距底部1cm的细线,并用铅笔在该细线上画一小点。用毛细管吸取半管浓缩液,点在小点处,注意要使点样的点尽量小。
摸条件:配制不同比例的石油醚:丙酮展开剂进行摸条件,仅仅使要分离的成分的Rf值大于0.2,其他小于0.2。
冲柱子:通过上步摸条件确定洗脱剂比例(展开剂极性小的乘2),通过正向柱进行上样并进行梯度洗脱,收集馏分根据检测合并不同物质的馏分。即可分离色素。
注意取新鲜的绿叶进行实验